The Karyotype of Holoaden luederwaldti (Anura, Strabomantidae), with Report of Natural Triploidy

Abstract

The genus Holoaden includes three species described so far, but the only published cytogenetic data is from Holoaden bradei, with the karyotype 2n = 18, based on conventional staining. In the present paper we report, for the first time, data on chromosomes of H. luederwaldti, which presented 2n = 18 and a case of natural triploidy, with 2n = 3x = 27. In this sample, another karyotypic variation was observed due to the occurrence of two types of chromosome 8, which present submetacentric or subtelocentric morphologies. Homomorphic subtelocentric or heteromorphic condition was observed among the diploid specimens, whereas the triploid had one submetacentric and two subtelocentric chromosomes 8. In all specimens, Ag-NOR was located in the long arms of chromosomes 8, at the interstitial region when subtelocentric, or in the proximal region when submetacentric, confirmed by fluorescent in situ hybridization with the HM123 probe. The C bands showed centromeric distribution and distribution at Ag-NOR site. The centromeric heterochromatin was fluorescent with DAPI staining, whereas the Ag-NOR displayed bright fluorescence with CMA(3). Fluorescent in situ hybridization using a telomeric probe labelled exclusively the telomere regions. Although the same 2n = 18 chromosome numbers have been observed in H. luederwaldti and H. bradei, some differences in both karyotypes can be visualized, mainly with regard to the morphology of the last chromosome pairs.

O gênero Holoaden inclui três espécies descritas até agora, mas o único dado citogenético publicado é de Holoaden bradei, com o cariótipo 2n = 18, baseado na coloração convencional. No presente trabalho relatamos, pela primeira vez, dados sobre os cromossomos de H. luederwaldti, que apresentava 2n = 18 e um caso de triploidia natural, com 2n = 3x = 27. Nesta amostra, outra variação cariotípica foi observada devido a a ocorrência de dois tipos de cromossomo 8, que apresentam morfologias submetacêntricas ou subtelocêntricas. Condição homomórfica subtelocêntrica ou heteromórfica foi observada entre os espécimes diplóides, enquanto que o triplóide tinha um cromossomo submetacêntrico e dois subtelocêntricos 8. Em todos os espécimes, Ag-NOR estava localizado nos braços longos dos cromossomos 8, na região intersticial quando subtelocêntrico, ou na região proximal quando submetacêntrica, confirmada por hibridização fluorescente in situ com a sonda HM123. As bandas C mostraram distribuição e distribuição centromérica no site Ag-NOR. A heterocromatina centromérica era fluorescente com coloração DAPI, enquanto a Ag-NOR exibia fluorescência brilhante com CMA3. Hibridização fluorescente in situ usando uma sonda telomérica marcada exclusivamente as regiões teloméricas. Embora os mesmos números cromossômicos 2n = 18 tenham sido observados em H. luederwaldti e H. bradei, algumas diferenças em ambos os cariótipos podem ser visualizadas, principalmente no que diz respeito à morfologia dos últimos pares de cromossomos. A heterocromatina centromérica era fluorescente com coloração DAPI, enquanto a Ag-NOR exibia fluorescência brilhante com CMA3. Hibridização fluorescente in situ usando uma sonda telomérica marcada exclusivamente as regiões teloméricas. Embora os mesmos números cromossômicos 2n = 18 tenham sido observados em H. luederwaldti e H. bradei, algumas diferenças em ambos os cariótipos podem ser visualizadas, principalmente no que diz respeito à morfologia dos últimos pares de cromossomos. A heterocromatina centromérica era fluorescente com coloração DAPI, enquanto a Ag-NOR exibia fluorescência brilhante com CMA3. Hibridização fluorescente in situ usando uma sonda telomérica marcada exclusivamente as regiões teloméricas. Embora os mesmos números cromossômicos 2n = 18 tenham sido observados em H. luederwaldti e H. bradei, algumas diferenças em ambos os cariótipos podem ser visualizadas, principalmente no que diz respeito à morfologia dos últimos pares de cromossomos.